离子层析法&MEKC
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离子色谱法
(Ion-exchange chromatography)

离子色谱(或离子交换色谱)是根据离子和极性分子与离子交换器的亲和力来分离离子和极性分子的色谱过程。它几乎作用于任何类型的带电分子–包括大蛋白质、小核苷酸和氨基酸。

离子色谱法原理

阳离子交换(cation exchange)

当感兴趣的分子带正电荷时,使用阳离子交换色谱法。因为层析的pH小于等电点,所以分子带正电荷。在这种类型的色谱中,固定相带负电荷,带正电的分子被负载以被吸引。

阴离子交换(anion exchange)

阴离子交换色谱是指固定相带正电,带负电的分子(即色谱用的pH值大于等电点)被吸附在固定相上。它经常用于蛋白质纯化、水分析和质量控制。

等电点是一个分子不携带净电荷或在统计平均值中是电中性时的pH值。

胶束电动色谱
(Micellar electrokinetic chromatography,MEKC)

MEKC原理图

胶束电动色谱(MEKC)是一种用于分析化学的色谱技术。它是对毛细管电泳(CE)的改进,将其功能扩展到中性分析,通过胶束(拟固定相,SDS)和周围的水缓冲液(流动相)之间的差异分配来分离样品。

具体原理可以理解为电泳和色谱的结合体:

如果分子带电(正电或负电),则可以理解为在两端外加电场的作用下,由于不同离子的电迁移率不同,在相中的运动速度不同,经过一定时间即可分离(即电泳性质)

如果是中性分子,则可通过加入胶束(SDS)通过电渗透使胶束外端的亲水基团和分子结合然后通过流动相和固定相之间的差异进行分离。具体指微胞和中性分子结合后然后通过电泳原理分离

优点是通过外加电场使得分离速度变快

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